HPLC kolony na bázi kovů
Rozpustnost silikagelu při vyšším pH mobilní fáze vedlo k vývoji alternativních HPLC kolon na bázi oxidů kovů (oxidu titaničitého, oxidu hlinitého), ale zejména oxidu zirkoničitého ( ZirChrom ® http://www.zirchrom.com/default.asp). Oxid zirkoničitý lze připravit ve formě monodisperzních porézních kulových částeček. Takto připravené kolony vykazují srovnatelnou účinnost s kolony silikagelovými. Největší výhodou oxidu zirkoničitého je jeho chemická a tepelná stabilita. Oxid zirkoničitý je stabilní v celém rozsahu pH při vysokém tlaku a teploty až do 200 °C. Extrémní stabilita oxidu zirkoničitého má za následek to, že HPLC kolony mohou být použity za extrémních podmínek (např. čištění kolony) a prodlužuje se životnost kolony. Tím se také snižuje cena za analýzu a rozšiřují se možnosti použití širokých chromatografických podmínek.
Oxid zirkoničitý nemá na svém povrchu silanolové skupiny, ale jsou přítomny naopak adsorpční centra charakteru Lewisových kyselin. Tento fakt vede k tomu, že do mobilních fází se musí přidávat pufry, které kompenzují silné interakce těchto center s hydroxylovými, fosfátovými či karboxylovými skupinami v molekulách látek.
Oxid zirkoničitý lze použít ve dvou módech – v normálním i reverzním módu.
Nemodifikovaný oxid zirkoničitý se používá v systému s normálními fázemi (ZirChrom®-PHASE).
Častější je použití oxidu zirkoničitého v reverzním módu. Povrch oxidu zirkoničitého se modifikuje tenkou vrstvou polybutadienu (ZirChrom®-PBD),
polystyrenu (ZirChrom®-PS)
nebo pyrolyticky vyloučeného uhlíku (ZirChrom®-CARB),
které lze případně modifikovat ligandem C18. K výběru správné HPLC kolony může dopomoci toto schéma:
|
Selektivita zirkoniových fází je lepší než alkylsilikagelových fází v normálním módu (ZirChrom®-PHASE)
ohledně separace stereoisomerů a velmi podobných sloučenin lišící se polaritou (steroidy), v reverzním módu při separaci silně polárních látek (ZirChrom®-EZ).
Použití, čištění a skladování kolon na bázi oxidu zirkoničitého naleznete zde. Obchodní zastoupení pro výrobce je v Evropě firma Alltech, v České republice pak Chromservis.
Last modified: