V praxi jsme omezeni při chromatografii na nepolární fázi výběrem několika málo organických solventů - methanol, acetonitril, tetrahydrofuran popř. dioxan, přesto tyto poskytují dostatečnou změnu a ovlivnění selektivity, zejména v kombinaci s použitím solventů s pufry nebo solemi o různém pH. O retenci rozhoduje především polarita solutu a polarita a koncentrace organického rozpouštědla v mobilní fázi. Pro výběr organických rozpouštědel a následné nahrazení jednoho rozpouštědla druhým bez výrazné změny retence, byly formulovány empirická přenosová pravidla, která zjednodušují možnost výběru jednotlivých organických rozpouštědel. První pravidlo bylo navrženo Schoenmakersem:
|
(1) |
|
(2) |
a druhé empirické pravidlo bylo navrženo Haddadem:
|
(3) |
|
(4) |
přičemž druhé pravidlo více odpovídá skutečnosti pro polární látky podléhající ionizaci.
Z rovnice (1) a (2) resp. (3) a (4) můžeme vypočítat např. koncentraci acetonitrilu (jMeCN) a tetrahydrofuranu (jTHF) jako účinné eluční složky při záměně za methanol o koncentraci (jMeOH) = 0,8. Pro acetonitril pak vyjde (jMeCN) = 0,66 a tetrahydrofuran (jTHF) = 0,53 podle rovnic (1) a (2) a (jMeCN) = 0,54 a tetrahydrofuran (jTHF) = 0,38 podle rovnic (3) a (4).
Pro zjednodušení výpočtu můžete použít jednoduchý kalkulátor, který naleznete zde...